Лигациядан тәуелсіз клондау - Ligation-independent cloning

Лигациядан тәуелсіз клондау (LIC) дегеніміз молекулалық клондау қолданбай-ақ орындалуға қабілетті шектеу эндонуклеазалар немесе ДНҚ лигазы. Техника 1990 жылдардың басында рестрикциялық фермент / лигаза клондауына балама ретінде жасалды.[1] Бұл шектеу учаскелері бар гендерді енгізілген қызығушылық генін кесіп алудан алаңдамай клондауға мүмкіндік береді.[2][3][4][түсіндіру қажет ]

Хаттама

  1. LIC кеңейтілген ПТР праймерлерін жасаңыз
  2. Генді күшейту үшін ПТР жасаңыз
  3. ПТР өнімін тазалаңыз
  4. 5 'өсінді жасаңыз
  5. Векторлық және ПТР өнімін күйдіру үшін инкубациялаңыз
  6. Түрлендіру

Әдебиеттер тізімі

  1. ^ «Жіксіз клондау | NEB». www.neb.com. Алынған 2020-01-23.
  2. ^ «Байланысты тәуелсіз клондау (LIC)». Жаңа Англия BioLabs (NEB). Алынған 15 қаңтар 2016.
  3. ^ «Лигонмен тәуелсіз клондау арқылы сіздің клоныңыздың 90% -ын алыңыз». Bitesize Bio. Алынған 2012-05-09.
  4. ^ Хаун, RS; Сервенти, IM; Мосс, Дж (1992). «Модификацияланған плазмида векторларын қолдана отырып ПТР өнімдерін жылдам, сенімді байланыстыруға тәуелсіз клондау». Биотехника. 13 (4): 515–8. PMID  1362067.

Әрі қарай оқу